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用鼠尾胶原蛋白进行胶原收缩测定

2024/3/28 8:08:47发布32次查看
用鼠尾胶原蛋白进行胶原收缩测定
acox3 功能障碍是颈内动脉复发性自发性血管痉挛的潜在原因
使用的先进 biomatrix 产品:
ratcol® i 型鼠尾胶原蛋白 (4 mg/ml) 和中和溶液(包含在鼠尾胶原蛋白试剂盒中)
产品的使用方式:
我们的胶原蛋白用于形成 3d 水凝胶,并用 hasmc 播种/嵌入。作为胶原蛋白收缩测定的一部分,每 24 小时测量一次胶原蛋白水凝胶。
文章摘要:
颅外颈内动脉复发性自发性血管痉挛(rsv-eica)是导致年轻人缺血性卒中的一个鲜为人知的原因。然而,其病理生理学仍然很大程度上未知。通过对受 rsv-eica 影响的两个韩国异卵双胞胎兄弟的 acox3 基因进行全外显子组测序,我们鉴定了两种复合杂合错义变异 c.235 t >g (p.f79 v) 和 c.665g>a (p.g222e) )。计算机分析表明,这两种变体均被归类为致病性。体外 acox3 酶测定表明 f79 v 和 g222e 突变体实际上没有酶活性。为了确定突变体对血管痉挛的影响,我们对人主动脉平滑肌细胞(hasmc)进行了胶原收缩测定。
carbachol 是一种胆碱能激动剂,可诱导 hasmc 收缩。使用 sirna 敲低 hasmc 中的 acox3,可显着抑制由卡巴胆碱引发的 hasmc 收缩。通过编码sirna抗性野生型acox3的质粒转染,卡巴胆碱诱导的hasmc收缩得到恢复,但通过acox3 g222e转染或acox3 f79v和acox3 g222e共转染则不能恢复,表明两种acox3突变体抑制卡巴胆碱诱导的hasmc收缩。我们认为 acox3 功能障碍会引起基底主动脉肌源张力的长期丧失。结果,颈内动脉中间段的平滑肌(其中交感神经支配特别丰富)变得对拟交感神经刺激(例如剧烈运动)过敏,导致复发性血管痉挛。因此,acox3功能障碍可能是rsv-eica的致病机制。我们第一次报道了 acox3 可能参与维持人动脉平滑肌的基础肌源张力。
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